腦定位注射動物實驗是一種在神經科學、藥理學及疾病模型研究中廣泛應用的精準操作技術，用于將藥物、病毒載體、示蹤劑、基因編輯工具（如CRISPR）或細胞等物質微量、定點地注入實驗動物（通常為小鼠或大鼠）特定腦區，以研究神經環路功能、疾病機制或治療策略。
該實驗依賴立體定位儀（stereotaxic apparatus）實現高精度操作。首先，將麻醉后的動物固定于定位儀上，通過耳桿和門齒夾確保頭部穩定；隨后，依據標準腦圖譜（如Paxinos&Watson圖譜），結合顱骨表面標志（如前囟Bregma點），計算目標腦區的三維坐標（前后AP、左右ML、深淺DV）。接著，進行頭皮切開、顱骨鉆孔，將微量注射針（如33–35G不銹鋼或玻璃毛細管）緩慢插入目標位置，通過微量注射泵以納升至微升級流量（如100–500 nL/min）注入試劑，注射后留針數分鐘以防止回流。
1、動物選擇與適應
品種與年齡：根據實驗目的選擇合適動物（如小鼠、大鼠、兔等），并確保年齡、體重匹配，減少個體差異對結果的影響。
健康狀態：實驗前檢查動物健康狀況，排除感染、疾病或行為異常個體。
適應性飼養：提前將動物轉移至實驗環境，適應溫度、光照、噪音等條件，減少應激反應。
2、麻醉與鎮痛
麻醉劑選擇：根據動物種類和手術時長選擇麻醉方式（如吸入麻醉異f烷、注射麻醉戊巴b妥鈉），確保深度麻醉且無疼痛反應。
麻醉監測：持續監測呼吸頻率、心率、角膜反射等指標，避免麻醉過深或過淺。
術后鎮痛：實驗后根據疼痛程度給予鎮痛藥物（如布洛f、卡洛芬），減輕動物痛苦。
3、立體定位儀校準
坐標系統：使用標準腦圖譜（如Paxinos&Watson大鼠腦圖譜）確定注射靶點坐標（如前囟后、旁開、深度）。
儀器校準：實驗前校準立體定位儀，確保三維移動精度（誤差≤0.1mm），避免因儀器偏差導致定位錯誤。
